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組織培養(yǎng)中活性炭的應(yīng)用方法
日期:2008-07-23 來(lái)源:中國(guó)組培網(wǎng) 作者: 我要評(píng)論()
活性炭為木炭粉碎經(jīng)加工形成的粉沫結(jié)構(gòu),它結(jié)構(gòu)疏松,孔隙大,吸水力強(qiáng),有很強(qiáng)的吸附作用,它的顆粒大小決定著吸附能力、粒度越小,吸附能力越大。溫度低吸附力強(qiáng),溫度高吸附力減弱,甚至解吸附。通常使用濃度為0.5-l0g/L。它可以吸附非極性物質(zhì)和色素等大分子物質(zhì),包括瓊脂中所含的雜質(zhì),培養(yǎng)物分泌的酚、醌類物質(zhì)以及蔗糖在高壓消毒時(shí)產(chǎn)生的5-羥甲基糖醛及激素等。 活性炭的應(yīng)用: (1)莖尖初代培養(yǎng),加入適量活性炭,可以吸附外植體產(chǎn)生的致死性褐化物,其效力優(yōu)于Vc和半胱氨酸;在新梢增殖階段,活性炭可明顯促進(jìn)新梢的形成和伸長(zhǎng),但其作用有一個(gè)閾值,一般為0.1%-0.2%,不能超過(guò)0.2%。 �。�2)活性炭在生根時(shí)有明顯的促進(jìn)作用,其機(jī)理一般認(rèn)為與活性炭減弱光照有關(guān),可能是由于根頂端產(chǎn)生促進(jìn)根生長(zhǎng)的IAA,但I(xiàn)AA易受可見(jiàn)光的光氧化而破壞,因此活性炭的主要作用就在于通過(guò)減弱光照保護(hù)了IAA,從而間接促進(jìn)了根的生長(zhǎng),由于根的生長(zhǎng)加快,吸收能力增強(qiáng),反過(guò)來(lái)又促進(jìn)莖、葉的生長(zhǎng)。 �。�3)此外,在培養(yǎng)基中加入0.3%活性炭,還可降低玻璃苗的產(chǎn)生頻率,對(duì)防止產(chǎn)生玻璃苗有良好作用。 �。�4)活性炭在胚胎培養(yǎng)中也有一定作用,如在葡萄胚珠培養(yǎng)時(shí)向培養(yǎng)基加入0.1%的活性炭,可減少組織變褐和培養(yǎng)基變色,產(chǎn)生較少的愈傷組織。 但是,活性炭具有副作用,研究表示,每毫克的活性炭能吸附l00ng左右的生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì),這說(shuō)明只需要極少量的活性炭就可以完全吸附培養(yǎng)基中的調(diào)節(jié)物質(zhì)。大量的活性炭加入會(huì)削弱瓊脂的凝固能力,因此要多加一些瓊脂。很細(xì)的活性炭也易沉淀,通常在瓊脂凝固之前,要輕輕搖動(dòng)培養(yǎng)瓶。總之,那種隨意抓一撮活性炭放人培養(yǎng)基,會(huì)帶來(lái)不良的后果。因此,在使用時(shí)要有其量的意識(shí),使活性炭發(fā)揮其積極作用。
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